學(xué)術(shù)園地
編輯：李曉蘭
【摘要】在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中，有許多檢測(cè)項(xiàng)目的血液標(biāo)本是需要抗凝才可以檢測(cè)的。本文主要注重介紹幾種常用抗凝劑的特點(diǎn)及其在實(shí)際中的應(yīng)用。
【關(guān)鍵詞】特點(diǎn)；應(yīng)用；抗凝劑；
引言
在血液學(xué)檢驗(yàn)中，有許多項(xiàng)目的血標(biāo)本是需要抗凝劑的，但抗凝劑種類很多�？鼓齽┑倪x擇是根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目確定的，不同的抗凝劑性質(zhì)各異，對(duì)血液成分有不同的影響，因此必須依檢驗(yàn)?zāi)康亩m當(dāng)選擇，才能獲得預(yù)期的結(jié)果。臨床檢驗(yàn)常用的抗凝劑有EDTA、肝素、枸櫞酸鈉以及草酸鹽等4種，現(xiàn)將它們的特點(diǎn)及應(yīng)用分別敘述如下。
1 肝素
肝素抗凝是用于血液化學(xué)成分檢測(cè)的首選抗凝劑。肝素是一種含有硫酸基團(tuán)的粘多糖，是分散相物質(zhì)平均分子質(zhì)量為15000。其抗凝原理主要是通過與抗凝血酶Ⅲ結(jié)合引起抗凝血酶Ⅲ構(gòu)型發(fā)生變化，加速凝血酶-凝血酶復(fù)合體形成而產(chǎn)生抗凝作用。此外，肝素還能借助血漿輔助因子（肝素輔助因子Ⅱ）來抑制凝血酶。常用肝素抗凝劑是肝素的鈉、鉀、鋰、銨鹽，其中以肝素鋰最好，但其價(jià)格較貴，鈉、鉀鹽會(huì)增加血液中的鈉、鉀含量，銨鹽會(huì)增加尿素氮的含量。通常用肝素抗凝的劑量為10.0～12.5 IU/ml血液。
肝素對(duì)血液成分干擾較少，不影響紅細(xì)胞體積，不引起溶血，適用于做紅細(xì)胞滲透性試驗(yàn)、血?dú)�、血漿滲透量、紅細(xì)胞壓積及普通生化測(cè)定。但肝素具有抗凝血酶作用，不適合做血凝試驗(yàn)。另外，肝素過量可引起白細(xì)胞聚集和血小板減少，所以不適合做白細(xì)胞分類和血小板計(jì)數(shù)，更不能用于止血檢驗(yàn)。此外，肝素抗凝血不能用于制作血涂片，因?yàn)?span>Wright染色后出現(xiàn)深藍(lán)色背景，影響顯微鏡減產(chǎn)。肝素抗凝血應(yīng)于短時(shí)間內(nèi)使用，否則放置過久血液又可凝固。
2 乙二胺四乙酸鹽(EDTA鹽)
EDTA能與血液中Ca2+結(jié)合成螯合物，凝血過程被阻斷，血液不能發(fā)生凝固。EDTA鹽有鉀、鈉、鋰鹽，國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦使用的是EDTA-K2，其溶解度最高，抗凝速度最快。EDTA鹽通常配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)是15%的水溶液，每ml血液加1.2mgEDTA，即每5ml血液加0.04ml 15%EDTA溶液。EDTA鹽可在100℃下干燥，抗凝作用不變。
此抗凝劑不影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)及大小，對(duì)紅細(xì)胞形態(tài)影響最小，并且可以抑制血小板的聚集，適用于一般血液學(xué)檢測(cè)。但如果抗凝劑濃度過高，滲透壓上升，會(huì)造成細(xì)胞皺縮。EDTA溶液pH與鹽類關(guān)系較大，低pH可使細(xì)胞膨脹。EDTA-K2可使紅細(xì)胞體積輕度膨脹，采血后短時(shí)間內(nèi)平均血小板體積非常不穩(wěn)定半小時(shí)后趨于穩(wěn)定。EDTA-K2使Ca2+、Mg2+下降，同時(shí)使肌酸激酶、堿性磷酸酶降低，EDTA-K2的最佳濃度為1.5mg/ml血液，如果血少，中性粒細(xì)胞會(huì)腫脹分葉消失，血小板會(huì)腫脹、崩解，產(chǎn)生正常血小板的碎片，使分析結(jié)果產(chǎn)生錯(cuò)誤。EDTA由于能抑制或干涉纖維蛋白凝塊形成時(shí)纖維蛋白單體的聚合，不適于血凝和血小板功能檢測(cè)，也不適用于鈣、鉀、鈉及含氮物質(zhì)的測(cè)定。此外，EDTA能影響某些酶的活性和抑制紅斑狼瘡因子，故不適合制作組化染色和檢查紅斑狼瘡細(xì)胞的血涂片。
3 枸櫞酸鹽
枸櫞酸鹽主要是枸櫞酸鈉，其抗凝原理是能與血液中的Ca2+結(jié)合形成螯合物，使Ca2+失去凝血功能，凝血過程被阻斷，從而阻止血液凝固。枸櫞酸鈉有Na3C6H5O7·2H2O和2Na3C6H5O7·11H2O兩種晶體，通常用前者配成3.8%或3.2%的水溶液，與血液按照1:9體積混合。
大部分凝血試驗(yàn)都可用枸櫞酸鈉抗凝，它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的穩(wěn)定，并且對(duì)平均血小板體積及其他凝血因子影響較小，可用于血小板功能分析。枸櫞酸鈉細(xì)胞毒性較小，也是輸血中血液保養(yǎng)液的成分之一。但是，枸櫞酸鈉6mg才能抗凝1ml血液，堿性強(qiáng)，不適用于血液化驗(yàn)和生化測(cè)驗(yàn)。
在進(jìn)行血小板聚集功能檢測(cè)時(shí)，選用3.8%枸櫞酸鈉作為抗凝劑。使用低濃度的枸櫞酸鈉抗凝劑（如3.2%的枸櫞酸鈉）更易引起血小板活化，導(dǎo)致血小板在檢測(cè)前就已經(jīng)聚集。
4 草酸鹽
草酸鹽也是常用的抗凝劑，優(yōu)點(diǎn)是溶解度大，作用原理是溶解后解離的草酸根與標(biāo)本中的Ca2+形成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血過程被阻斷。常用的草酸鹽抗凝劑種類有草酸鈉、草酸鉀和草酸銨，草酸鈉的常用濃度為O.1 mol/L，與血液按1:9比例使用。但是，高濃度k+或Na+易使血細(xì)胞脫水皺縮，而草酸銨則可使血細(xì)胞膨脹，故測(cè)定血細(xì)胞比容時(shí)用草酸銨與草酸鉀或草酸鈉兩者適當(dāng)比例混合的抗凝劑，恰好不影響紅細(xì)胞的形態(tài)和體積。常用于血液生化測(cè)定，但不適用于K+、Ca2+的測(cè)定。由于生成草酸鈣沉淀，紅細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)鋸齒狀，白細(xì)胞出現(xiàn)空泡，淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞會(huì)變形，不宜做血片檢查。草酸鹽可使血小板聚集，并影響白細(xì)胞形態(tài)，不能用于白細(xì)胞和血小板分類計(jì)數(shù)。
結(jié)語：
抗凝劑在實(shí)驗(yàn)室檢查中很重要，隨著相關(guān)研究的不斷深入，對(duì)于實(shí)驗(yàn)室檢查中的血液標(biāo)本選擇和抗凝劑的使用不斷會(huì)有新的認(rèn)識(shí)，要求檢驗(yàn)工作者轉(zhuǎn)變一律使用血清檢測(cè)的傳統(tǒng)觀念，根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目選用合適的抗凝劑，以便為臨床提供正確有效的檢測(cè)結(jié)果。
【參考文獻(xiàn)】
[1] 薛俊太,鄧翠華,袁問東等.實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中抗凝劑的選擇和使用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床.2009,6(8)：633-640.
[2] 周偉青.抗凝劑在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志.2006,15（24）：3403-3404.
